Protocolo de experimentação: Extração de DNA

Em nossa atividade prática utilizaremos a cebola, pois ela possui pequenas quantidades de pectina (que podem ser facilmente confundidas com o DNA) e por apresentar células grandes que se rompem quando a cebola é picada. Para a nossa experiência serão necessários os seguintes materiais:

·        Uma cebola grande;

·        Faca de cozinha;

·        Uma colher de sopa;

·        Uma colher de chá;

·        Dois copos;

·        Água filtrada;

·        Sal de cozinha;

·        Detergente;

·        Álcool gelado;

·        Bastão fino de vidro ou madeira bastão;

·        Filtro de café;

·        Gelo moído;

·        Local para se fazer banho-maria.

Fazendo a experiência

·        Com a faca de cozinha, pique a cebola em pedaços;

·        Coloque quatro colheres de sopa de detergente e uma colher de chá de sal em meio copo de água. Mexa bem até a solução se dissolver completamente;

·        Coloque a cebola picada no copo com a solução de detergente e sal e leve ao banho-maria por 15 minutos;

·        Retire a mistura do banho-maria e coloque o copo no gelo por cinco minutos, de forma que a solução resfrie;

·        Depois de resfriada, coe a mistura no filtro de papel e recolha o filtrado em um copo limpo;

·        A esse filtrado adicione meio copo de álcool gelado. Deixe o álcool escorrer vagarosamente pela borda, de forma que se obtenham duas fases: a superior, alcoólica; e a inferior, aquosa;

·        Com o bastão, faça movimentos circulares misturando as fases;

·        À medida que se mistura a solução, vão se formando fios esbranquiçados. Esses fios são aglomerados de moléculas de DNA.

Todos poderão observar os filamentos de DNA na objetiva 40.

Qual é a função do sal de cozinha, do detergente e do álcool gelado utilizados na extração do DNA?

O detergente, por possuir um componente chamado de lauril sulfato de sódio, desnatura as membranas lipídicas e as proteínas, desintegrando os núcleos e os cromossomos das células da cebola, separando o DNA cromossômico.

O sal misturado à água foi utilizado para neutralizar o DNA, que precipitará com o álcool gelado. O álcool gelado em solução salina proporciona uma solução heterogênea e faz com que as moléculas de DNA se aglutinem, formando a massa filamentosa e esbranquiçada.